МЕТОДЫ НАУКИ

Методы феногеографии Главный метод феногеографии - сопоставление фенофондов. Его можно провести двумя путями - на карте и без нее. В обоих случаях анализ производится двумя способами: по одному фену либо сразу по комплексу фенов. Часто сопоставление по одному фену

Глава 13. Война спермы: чего не могут рассказать открытия палеонтологии Ничего, или почти ничего, в размножении животных нет осмысленного, если только не рассматривать репродукцию в свете соревнования спермы. Профессор Тим Беркхед Скандальная книга Робина Бейкера «Войны

11.2. Методы психогенетики Поскольку методы классической генетики обычно неприменимы к исследованию человека, в психогенетике разработаны собственные методы.Генеалогический метод. Метод исследования семей и анализ их родословных. Чем больше поколений включает

В данном случае речь идет об искусственном осеменении , которому их владельцы дали термин «искусственная вязка собак».
Эта методика известна с восемнадцатого века. Начало ей положили опыты двух итальянцев. Чуть позднее практика искусственного оплодотворения была внедрена в России, где русские ученые продолжили изучение метода и даже разработали способы заморозки и хранения спермы. Это позволило в середине двадцатого столетия провести операцию по осеменению на собаке и получить вполне здоровых щенков.

Искусственная вязка собак: зачем это нужно?

Такой вопрос может возникнуть у любого человека. Но многие заводчики, занимающиеся племенным разведением породистых собак, уже давно оценили прекрасные возможности методики. Она позволяет использовать сперму кобелей с отличными показателями, которые находятся далеко от суки. Например, в другом городе или стране.

Вторым «плюсом» искусственной вязки можно считать сведение к нулю риска заболеваний, способных передаваться от одной особи к другой через половой контакт. Дело в том, что синтетические разбавители спермы имеют в своем составе антибиотики, уничтожающие инфекцию.
Кроме этого, существует ряд показаний, когда искусственная вязка собак предпочтительнее обычной.

К ним относится:
· физиологические особенности суки, имеющей узкое и короткое влагалище;
· особенности экстерьера, затрудняющие спаривание (большой вес, крупный размер и так далее);
· наличие заболеваний неинфекционного характера, мешающих вязке собак ( конечностей или спины);
· недружелюбное отношение животных друг к другу.

В целом, методика искусственной вязки хорошо отработана и дает положительные результаты. Однако владельцы собак должны понимать, что проведение такой процедуры может проходить только при участии высококвалифицированных специалистов, располагающих специальным оборудованием и материалами. Именно от этого зависит здоровье собак и их потомства.

Перед проведением искусственного осеменения (ИО) - в случае вероятных проблем при вязке - как владелец животного, так и ветеринарный врач должны учесть психологические и физиологические механизмы нормальной вязки. Тем более что психологию взаимоотношений во время вязки понимают далеко не все заводчики. Для вязки суку доставляют к производителю, а не наоборот; соблюдение этого условия особенно важно в случае, если речь идет о первой вязке молодого кобеля. Желательно, чтобы пару молодому кобелю составляла опытная сука, и наоборот - партнером для неопытной суки был выбран зрелый кобель.

Между кобелем и сукой складываются определенные взаимоотношения, возникает симпатия или, наоборот, неприязнь, которая может привести к тому, что кто-то из партнеров откажется от коитуса. Социальный статус кобеля или суки и фактор доминирования также способны создавать проблемы. Молодой самец, занимающий подчиненное положение, в обществе доминирующей суки испытывает робость, которая оборачивается трудностями при попытке совершить садку или интромиссию. Доминирующая сука даже в период эструса может подавлять такого партнера, вынуждая его отказаться от вязки, зато охотно спарится с кобелем, занимающим доминирующее положение. Поскольку существуют проблемы, причины которых выходят за рамки физиологии, целесообразно рассмотреть некоторые психологические факторы.

Часто признаки приближения течки становятся заметны за несколько недель до наступления проэструса. Сука заигрывает или делает садку на других собак - как на кобелей, так и на сук. У нее снижается или, наоборот, повышается аппетит, она начинает чаще мочиться, проявляет непослушание, хуже ведет себя во время дрессировки. Для опытного заводчика такое поведение является сигналом, что приближается течка.

В период проэструса у суки повышается интерес к общению с другими собаками. Но на приближение кобеля она реагирует пассивно, может даже укусить и отогнать его, если он попытается ее обнюхать. В конце проэструса поведение меняется. Сука становится игривой, проявляет инициативу в общении с самцами, позволяет им обнюхивать себя. Начало эструса отмечается характерным поведением, например, сука стоит, помахивая хвостом, и отводит его в сторону. Некоторые суки при обнюхивании самцом приподнимают круп, демонстрируя вульву. Когда кобель кладет лапу на спину суки, она прогибается (лордоз) и может сама заигрывать с ним (толкать носом, класть лапу на спину, имитировать садку), если он по какой-то причине проявляет робость. Во время вязки сука стоит спокойно, широко расставив задние лапы, приподняв круп и отведя в сторону хвост.

Молодые кобели демонстрируют садку с самого раннего возраста (с 4–5 недель), это считается нормой. Такая активность важна для кобеля и является тренировкой полового поведения. Кроме того, садка на других собак или неодушевленные предметы способствует половому созреванию. Однако подобное поведение необходимо решительно пресекать, если оно направлено на людей, а особенно на детей.

Феромоны, содержащиеся в вагинальных выделениях и моче течной суки, привлекают кобелей даже на значительном расстоянии и побуждают их следовать за ней. При совместном содержании кобель зачастую даже отказываться от пищи и воды, если у суки течка. На это время его лучше удалить. Некоторые кобели проявляют склонность к голосовому выражению возбуждения и воют без устали целыми днями. Другие пытаются убежать от хозяев, выбив с этой целью дверь или окно, сделав подкоп или перепрыгнув через изгородь; на пресечение таких попыток они нередко отвечают деструктивным поведением. У кобелей, страдающих заболеваниями предстательной железы (например, кистозной гиперплазией), наблюдаются кровянистые выделения из пениса, объясняющиеся разрывом из-за возбуждения, заполненных кровью кист.

Поведение кобеля и принимаемые им позы при встрече с течной сукой обычно свидетельствуют об игривом настроении с примесью опасения, последнее напрямую зависит от социального статуса кобеля. Он приближается к суке, помахивая хвостом, насторожив уши, избегает смотреть на нее пристально. Если она позволяет ему приблизиться, кобель вылизывает ей уши и морду, обнюхивает ее, кладет ей на спину лапу или голову. Если сука не проявляет дружелюбия, кобель может начать игру, дабы усыпить ее бдительность, - он припадает к земле или предлагает суке догнать его.

Состоит из 6 этапов:

2. Кобель совершает активные движения и интромиссию - начальная эрекция.

3. Эрекция - набухание головки полового члена - отделение первой фракции эякулята (прозрачный секрет предстательной железы).

4. Эякуляция - отделение второй фракции (белая, содержащая сперму жидкость) - ротация.

5. Замок - продвижение спермы - отделение третьей фракции (прозрачный секрет предстательной железы).

6. Разрыв замка и окончание вязки.

Если сука подпускает кобеля (фиг. 9.1), он обхватывает ее круп передними лапами и совершает характерные движения. Неопытный кобель обычно контролирует свои движения, пытаясь сориентировать пенис и обнаружить вульву суки. Начальная эрекция обеспечивает интромиссию с помощью кости полового члена. При контакте с вульвой движения кобеля активизируются.

Садка

После введения пениса в вульву движения кобеля становятся более активными и энергичными. Он переступает с ноги на ногу (приплясывает), слегка приподнявшись над сукой.

За время этой стадии достигается полная эрекция. Происходит удлинение головки полового члена, луковица остается закрепленной на кости пениса, тогда как pars longa glandis перемещается вперед поверх кости полового члена. Луковица набухает, обеспечивая сцепление пениса с влагалищем суки (замок). Звуки, издаваемые течной сукой, и ее запах стимулируют эрекцию, которая возникает благодаря импульсам, поступающим из возбуждающих (тазовых внутренностных) нервов, состоящих из парасимпатических волокон таза и крестцовых нервов. Нервные импульсы обеспечивают расширение наружных и внутренних срамных артерий, ведущих к пещеристым телам пениса; сокращение седалищноуретральных мышц предотвращает отток венозной крови. Кровь задерживается в синусах пещеристой ткани луковицы, вызывая ее набухание. Сокращение седалищно-кавернозной и луковично-губчатой мышц, а также констрикция вульвы во время замка поддерживают интенсивность эрекции. В ходе этой фазы выделяется первая фракция эякулята (1–2 мл прозрачного секрета простаты).

По достижении полной эрекции происходит отделение второй фракции, содержащей сперматозоиды (1–2 мл). Этот процесс занимает 1–2 минуты. Эякуляция происходит в результате стимуляции нервных окончаний пениса. Сперма с секретом предстательной железы выбрасывается благодаря сокращениям мускулатуры, окружающей уретру, в частности, бульбокавернозной и седалищнокавернозной мышц. Как правило, на этой стадии самец прекращает активные движения, что совпадает с началом эякуляции.

Самец поднимает одну лапу и поворачивается вокруг своей оси, принимая положение «хвост к хвосту» (фиг. 9.2), при этом головка пениса остается в первоначальном положении. Эластичный участок пениса, расположенный позади головки, обеспечивает разворот на 180 градусов. Разворот не причиняет животному дискомфорта, поскольку кость полового члена препятствует обтурации уретры во время эрекции и разворота. Согласно существующему предположению ротация вызывает окклюзию главной вены пениса и тем самым предотвращает прекращение эрекции. Некоторые кобели не совершают разворота, другие остаются в положении садки, что может причинять суке определенные неудобства, особенно если самец отличается крупными размерами; в таких случаях его осторожно приподнимают, облегчая положение самки.

Ротация

Во время замка кобель обычно стоит спокойно в положении «хвост к хвосту» (фиг. 9.3). На данной стадии происходит эякуляция третьей фракции семенной жидкости (5–20 мл секрета предстательной железы). Одновременно с движениями хвоста происходят ритмичные сокращения перинеальной мускулатуры.

Замок продолжается от 10 до 45 минут, однако автор статьи наблюдал замок, длившийся не менее часа. Насколько можно судить, продолжительность замка не оказывает влияния на результаты вязки. Оплодотворение происходит и при отсутствии замка, после эякуляции второй фракции эякулята, содержащей сперматозоиды, т. е. после окончания самцом толчкообразных движений. Существует предположение, что отсутствие замка сказывается на численности помета, однако, по наблюдениям автора, такое мнение ошибочно.

Во время вязки (садки, интромиссии и замка) опытные суки стоят спокойно. В некоторых случаях сука может попытаться уйти, увлекая за собой кобеля. Обычно такое поведение не причиняет вреда животным, однако разумнее придерживать суку за ошейник, предотвращая подобную попытку.

Перед разъединением эрекция головки полового члена спадает, и партнеры расходятся. Обычно самец вылизывает пенис, который после этого втягивается в препуций. Если между отверстием препуция и пенисом оказалась шерсть или туда попала кожа внешнего слоя препуция, вызывая болезненные ощущения, самцу оказывают помощь. Полная ретракция пениса достигается нажатием на препуций в 2–3 см позади отверстия входа, вызывающим раскрытие отверстия.

Замок

После вязки сука обычно энергично вылизывает влагалище, удаляя вытекшую сперму. Некоторые самки могут демонстрировать возбуждение, прыгать и играть или кататься по земле. Останавливать животное или не позволять ему мочиться нецелесообразно, поскольку во время замка большая часть эякулята уже попала в матку и маточные трубы.

Несмотря на то, что сука подпускает кобеля и позволяет ему совершить садку, при некорректном выборе сроков вязки могут наблюдаться трудности, обусловленные значительным отеком влагалища. Кобель не в состоянии ввести пенис достаточно глубоко, в результате достичь замка не удается. Часто повторная попытка, предпринятая на следующий день, оказывается вполне успешной. Если животные молодые и неопытные, то кобелю следует оказать помощь: поддерживая его за круп, направляют пенис во влагалище.

Некоторые суки, обычно спокойные и мирные, могут паниковать во время интромиссии, проявлять агрессию по отношению к самцу и даже пытаться укусить владельца. В некоторых случаях целесообразно применение транквилизаторов или проведение искусственного осеменения, хотя в последнем случае следует принимать во внимание существующие в Kennel Club правила регистрации щенков, родившихся в результате ИО.

Констрикция кольцевых мышц влагалища, вызванная ригидностью гимена или стриктурой, препятствует полной интромиссии. Сохранение гимена характерно для молодых самок; дефект устраняют, введя палец в перчатке во влагалище. В некоторых случаях может возникать необходимость в хирургическом удалении гимена, однако образование рубцовой ткани может стать источником проблем при родах. Искусственное осеменение является наилучшей альтернативой при стриктуре влагалища или сохранении гимена, если имеющийся просвет позволяет ввести соответствующие инструменты. Опыт автора свидетельствует о том, что вагинальная стриктура подобного типа не вызывает дистоции во время родов.

Отек слизистой оболочки влагалища, наблюдаемый на стадии эструса, может приводить к ее чрезмерному набуханию и пролапсу. Гиперплазия слизистой препятствует совершению коитуса, а часто и введению инструментария для искусственного осеменения. Для лечения назначают вяжущие препараты и дезинфицирующие растворы, при тяжелых поражениях рекомендуется хирургическое удаление гипертрофированной ткани. Неосложненная гиперплазия слизистой влагалища, как правило, регрессирует после окончания эструса, однако у таких животных наблюдается тенденция к рецидивам заболевания в следующую течку. По этой причине сук, склонных к гиперплазии слизистой влагалища, не используют в племенном разведении.

Одной из наиболее распространенных проблем, вызывающих затруднения во время вязки, является неопытность самца. В подобных случаях кобель нередко пытается совершить интромиссию в области анального отверстия или ниже вульвы. Молодые кобели зачастую испытывают перевозбуждение, приводящее к преждевременной эрекции головки пениса, препятствующее интромиссии. На стадии начальной эрекции происходит эякуляция секрета простаты. Эякуляция второй фракции происходит позднее. Необходимо временно разлучить самца с партнершей и дать ему успокоиться, а через 30 минут предпринять вторую попытку. В случае неудачи наилучшим выходом является искусственное осеменение.

В редких случаях молодые кобели неспособны к совершению коитуса из-за фимоза, вызванного адгезией пениса и препуция или стриктурой отверстия препуция. В обоих случаях необходимо хирургическое вмешательство.

Отсутствие либидо у самца может быть обусловлено целым рядом причин, к которым относится неприязнь к половому партнеру, ошибка в выборе сроков вязки, гипоплазия тестикулов, заболевания предстательной железы, мочевые конкременты (редко), баланопостит, эпидидимит, вертебральный артроз (часто встречается у собак таких пород, как датская гончая и пекинес), заболевания нижнего отдела позвоночника (спондилез у боксеров) и задних конечностей (дисплазия тазобедренного сустава). Для выявления причины проводят клиническое обследование. Если либидо снижено из-за психологических проблем, замена партнерши может исправить ситуацию. При сохранении возбуждения самца спаривают с другой самкой или собирают сперму для искусственного осеменения. В тех случаях, когда обнаружены заболевания предстательной железы, мочевые конкременты, эпидидимит и баланопостит, проводят соответствующее лечение. Если проблемы с либидо объясняются наследственными заболеваниями, необходимо обсудить с владельцем этическую сторону вопроса и объяснить, почему животных с генетическими дефектами не используют в племенном разведении.

На основании своего опыта автор считает, что к условиям, обеспечивающим сбор спермы, относятся: присутствие раздражителя - обычно самки, находящейся в состоянии течки (предпочтительнее всего на пике эструса, но если сука будет вести себя спокойно, подойдет любая стадия); отдельное помещение и выход на площадку, на случай, если самец предпочитает предварительно поиграть с самкой; минимальное количество людей. Перечисленные условия благоприятно сказываются на параметрах спермы и значительно облегчают процедуру.

Кобелю дают возможность совершить садку. При выдвижении пениса из препуция оператор отводит последний назад и сдавливают пенис пальцами каудально от головки (фиг. 9.4).

Сбор спермы невозможен до достижения полной эрекции и прекращения толчкообразных движений самца. Для сбора спермы автор использует одноразовую воронкообразную пластиковую чашу. При проведении манипуляции необходимо исключить вероятность травмирования пениса о край сосуда. Такая травма может приводить к разрыву мелких сосудов головки пениса и попаданию крови в эякулят. Особенно склонны к кровотечениям старые собаки. Неизвестно, как присутствие крови сказывается на параметрах спермы, однако ее наличие затрудняет анализ. В идеале образец должен состоять лишь из второй фракции (содержащей сперматозоиды), особенно если сперму предполагается заморозить. При немедленном использовании для искусственного осеменения в пробирку со спермой добавляют 1–2 мл секрета предстательной железы и применяют без дополнительных растворителей.

Сбор спермы с использованием течной суки в качестве раздражителя. Оператор отводит препуций, захватывает луковицы в ладонь, а пальцами сжимает основание полового члена позади луковиц. Сперму собирают непосредственно в пластиковую пробирку

При проведении анализа определяют цвет семенной жидкости. Нормальным считают оттенки от молочного до слабо-кремового в зависимости от плотности; желтый оттенок недопустим и указывает на попадание мочи или на воспалительный процесс; красный свидетельствует о присутствии крови. Причину отклонения цвета эякулята от нормы выявляют в ходе микроскопического исследования. Эякулят, содержащий лейкоциты, эритроциты или мочу, центрифугируют при 300–1000 об/мин в течение 5 минут в разбавителе TRIS (табл. 9.1) или растворе с добавлением антибиотиков, супернатант удаляют, а осадок снова разводят в свежем разбавителе, содержащем антибиотики, и используют для искусственного осеменения.

Буферная база содержит антибиотики

Трисгидроксиметиламинометан - 6,056 г;

Лимонная кислота - 3,400 г;

Фруктоза - 2,500 г;

Дистиллированная вода двойной очистки - 200 мл;

Кристаллический пенициллин - 200 000 ЕД;

Дигидрострептомицин - 0,2 г;

Яичный желток вводят непосредственно перед добавлением воды (20 % объема) 2 мл желтка на 8 мл TRIS базы + антибиотики.

Оценку плотности спермы, т. е. концентрации сперматозоидов на единицу объема проводят с использованием счетной камеры и микроскопа или фотометрического счетчика для спермы (фиг. 9.5). Количество сперматозоидов в эякуляте вычисляют исходя из их числа в единице объема и полного объема. Общее количество сперматозоидов в сперме собак варьирует от 200 до 1200 х 10 6 , содержание во второй фракции 100–700 х 10 6 /мл.

Фотометрический калибратор Spermacue™ для измерения плотности (количества сперматозоидов в мл) свежеполученной неразведеннои спермы собак и лисиц

Прогрессивную подвижность (ПП) оценивают визуально под микроскопом со 100-кратным увеличением. Показатель прогрессивной подвижности (количество сперматозоидов с выраженным поступательным движением) минимально может составлять до 5 % при норме 75–90 % в неразбавленном свежесобранном эякуляте. В замороженной сперме, если ее предполагается использовать для искусственного осеменения, подвижность сперматозоидов после размораживания должна составлять не менее 50 %. Активность сперматозоидов (скорость поступательного движения) также является важным показателем, которому субъективно присваивается значение от 0 до 5, где 0 означает отсутствие прогрессивного движения (некроспермия), а 5 является наивысшим показателем. Нормальная фертильная сперма обычно имеет показатель 3–5; сперма, предназначенная для замораживания, перед заморозкой должна иметь высокие показатели, предпочтительно 5. Низкая температура снижает подвижность сперматозоидов, поэтому для анализа рекомендуется подогревать предметное стекло, в особенности при работе с размороженной спермой. Физиологические растворы, особенно содержащие глицерин, также временно снижают активность сперматозоидов, однако на подогретом предметном стекле она обычно восстанавливается через 2–3 минуты.

В последнее время достаточно широко применяют тест на целостность мембраны и жизнеспособность спермы (гипоосмотический тест). Тест включает инкубацию спермы в гипоосмотической среде, вызывающей набухание хвоста сперматозоида. Этот тест имеет хорошую корреляцию с подвижностью и жизнеспособностью спермы, но не с ее концентрацией.

Морфологический анализ (МА) служит для определения процента сперматозоидов с нормальным внешним видом либо с помощью фазово-контрастной микроскопии при 200-кратном увеличении, либо с использованием менее мощного микроскопа, но тогда с окрашиванием нигрозин-эозином (см. гл. 8). Морфологические показатели считают нормальными, если процентное соотношение морфологически неизмененных сперматозоидов колеблется в пределах от 65 до 90 %. Минимальный процент морфологически нормальных сперматозоидов, при котором сохраняется нормальная фертильность, для собак не установлен, однако показатель ниже 60 % обычно указывает на нарушения функции тестикул или эпидидимиса. У кобелей в период полового созревания до 40 % сперматозоидов могут иметь проксимальные цитоплазматические включения. Сперма, предназначенная для замораживания, должна содержать не менее 75 % морфологически нормальных сперматозоидов.

Показатель целостности акросом особенно важен для морфологической оценки спермы после размораживания. Для подсчета сперматозоидов с неповрежденной акросомой в лаборатории автора применяют окрашивание раствором Spermac™.

Для искусственного осеменения свежесобранной спермой ее разбавлять необязательно. Однако если предполагается транспортировка спермы и использование через 2–3 часа, ее разбавляют специальными разбавителями и транспортируют при температуре 4 ?С, поскольку такие условия способствуют поддержанию жизнеспособности сперматозоидов. Для транспортировки свежесобранной спермы автор с успехом применяет два вида разбавителей (табл. 9.1 и 9.2).

В эксперименте было проведено сравнение разбавителей, содержащих яичный желток, яичный желток в сочетании со сметаной и яичный желток в сочетании с молоком. Для хранения спермы при 4 ?С лучше всего подходит разбавитель TRIS. Во всех растворах желток предохраняет мембрану сперматозоидов от шока, вызываемого воздействием низкой температуры. Разведение спермы обычно проводят в соотношении 1:6 в зависимости от первоначальной концентрации. Важно, чтобы объем раствора превышал объем спермы, и если при сборе сперму не разделяли на фракции, ее центрифугируют и, удалив излишки секрета предстательной железы, смешивают с раствором.

Пастеризованные сливки 12 % жирности - 8 мл;

Яичный желток 20 % от объема - 2 мл.

Охлаждение при транспортировке обеспечивают, помещая образец в термос, частично заполненный колотым льдом. Для перевозки образца используют пластиковые пробирки для центрифуги (например, пробирку на 10 мл с завинчивающейся крышкой для клеточной культуры).

Пробирку с образцом помешают в изолированную колбу, колбу кладут в термос поверх слоя льда и оборачивают бумагой. Перед осеменением сперму постепенно согревают до 30–35 °C.

В литературе имеется подробное описание множества протоколов разведения, замораживания и размораживания спермы. Автор настоящей главы предпочитает работать с разбавителем TRIS, обеспечивающим хороший результат при хранении спермы собак и лисиц. Успешность последующего осеменения составляет 67–80 % при внутриматочном осеменении с использованием спермы с концентрацией 50–150 х 10 6 сперматозоидов в спермодозе и проведением осеменения в два приема с интервалом в 24 часа.

Для замораживания к основному раствору TRIS добавляют глицерин и антибиотики (табл. 9.1). Объем добавляемого глицерина составляет от 12 до 16 мл (6 и 8 % общего объема соответственно) в зависимости от техники замораживания: для автоматического замораживания добавляют 6 % глицерина, для ручного - 8 %. В раствор добавляют дистиллированную воду (188 или 184 мл вместо стандартных 200 мл).

В базовый раствор TRIS с глицерином добавляют 20 % яичного желтка. Яичный желток получают от кур, проверенных на отсутствие патогенных факторов (предназначенных на экспорт или домашних). Желток отделяют от белка, выкладывают на лист чистой бумаги, осторожно прокалывают и сливают в воронку и энергично взбивают стеклянной лопаткой, максимально измельчая его частицы, - это позволяет снизить связывание головок сперматозоидов частицами желтка, затрудняющее анализ спермы. Наконец, желток смешивают с буферным раствором TRIS, предварительно подогретым до 30 ?С. Смесь хорошо взбалтывают и нагревают до 35 ?С. Предварительно приготовленный разбавитель можно замораживать и сохранять в таком виде в течение 2 месяцев. Перед применением его размораживают на водяной бане при температуре 35 ?C.

Проводят микроскопическое исследование спермы на соответствие перечисленным выше критериям, затем ко второй фракции эякулята добавляют по каплям подогретый до 35 ?С разбавитель, пока необходимая концентрация не будет достигнута. В лаборатории автора для замораживания обычно используют образцы с общей концентрацией сперматозоидов 100 х 10 6 /мл. Однако при высоком качестве спермы концентрацию можно уменьшить наполовину.

После разбавления несколько капель образца исследуют под микроскопом, а разбавленную сперму сливают в пластиковые центрифужные пробирки, которые помещают в сосуд с водой, подогретой до 35 °C. Затем сосуд переносят в холодильник и оставляют на 2 часа при температуре 4 °C. За это время сперма охлаждается до 4–5 °C, а глицерин, выполняющий роль защитного фактора, проникает в мембрану сперматозоидов.

Сперму вынимают из холодильника, осторожно взбалтывают и немедленно помещают в пластиковые соломины (пайетты) емкостью 0,5 мл. Для выполнения процедуры применяют специальный отсос или насасывают ртом через латексную трубку. При распределении спермы следует проследить за тем, чтобы порошок, находящийся между концами фильтров соломины, пропитался жидкостью и затвердел. Сначала соломины заполняют наполовину, после чего, оставляя пузырек воздуха, доливают, не доводя 1 см до верха. Пузырек воздуха препятствует переливанию спермы (за счет изменения давления при размораживании). После этого соломину запечатывают.

Существуют два альтернативных метода заморозки - ручная (статический протокол) и автоматическая (динамический протокол). Доля глицерина в составе разбавителя зависит от применяемого метода. При ручной заморозке используют контейнер (30 х 40 х 30 см) из полистирола со съемной металлической полкой, помещенной на 10 см ниже края. Контейнер заполняют жидким азотом до уровня, находящегося на 4 см ниже полки.

Заполненные соломки (8–10 максимально) захватывают пинцетом, помещают горизонтально на полку и оставляют в испаряющемся азоте на 8 минут. Затем пинцет охлаждают в жидком азоте, приподнимают и поворачивают с его помощью пайетты, одну за другой, чтобы удостовериться в полной кристаллизации их содержимого. После этого пайетты погружают в жидкий азот. Такую процедуру называют статической в связи с присутствием постоянного нерегулируемого потока испаряющегося азота в период охлаждения и заморозки.

Автоматическая заморозка подразумевает использование машины. Такой способ называют динамическим, поскольку испаряющийся азот поступает в морозильную камеру с различной скоростью в зависимости от заданной программы, позволяющей регулировать темпы заморозки. Программа заморозки осуществляется автоматом Planer 10™, разработанным Hofmo (1988) для замораживания спермы лисиц. В настоящее время этот прибор используется в лаборатории автора, располагающей обширным запасом образцов спермы. Пайетты замораживают в горизонтальном положении на полке со съемной крышкой, причем в морозильной камере может находиться несколько таких полок. Программа заморозки включает следующие режимы:

2 ?С/мин. начиная с +4 °C до -7 °C;

50 ?С/мин. от -7 °C до -100 °C;

25 ?С/мин. от -100 ?С до -180 °C.

после окончания процедуры полку помещают непосредственно в жидкий азот.

Пайеггы размораживают на водяной бане (в термосе) при температуре 70 ?С в течение 8 секунд. После размораживания их ставят вертикально фильтром вниз, распечатывают крышку, встряхивают, чтобы пузырек воздуха мог подняться вверх. Соломку вскрывают и несколько капель образца помещают на подогретое предметное стекло для оценки параметров спермы после размораживания. До восстановления подвижности сперматозоидов проходит некоторое время, обычно 2 минут бывает достаточно. В связи с тем, что разные лаборатории используют различные техники замораживания, при размораживании образца спермы, полученного из какой-то определенной лаборатории, необходимо строго соблюдать все полученные оттуда рекомендации, поскольку процессы замораживания и размораживания тесно связаны между собой.

Практикуется в случаях, если естественная вязка невозможна по ряду причин: кобель и сука живут довольно далеко друг от друга; заводчик намерен осеменить несколько сук или опасается прямого контакта суки с производителем в связи с распространенностью инфекционных заболеваний.

Обычно предпринимают, если производитель находится далеко, а отправить свежую сперму не представляется возможным, либо в связи с запретом провозить через границу свежую сперму, либо в случае гибели производителя. В Европе и США существуют банки спермы в национальных собачьих клубах, в научных институтах и в некоторых частных компаниях.

При наличии свежей спермы процедуру осеменения проводят в день овуляции, а потом через 2 дня повторяют. При использовании замороженной спермы, которая характеризуется сниженной жизнеспособностью, поскольку процессы замораживания и размораживания оказывают негативное воздействие на акросомы и мембраны сперматозоидов, - осеменение осуществляют через 1–2 дня после овуляции, и вторую процедуру проводят через 24 часа после первой. Пробы прогестерона в сыворотке крови служат хорошим индикатором овуляции. Концентрация прогестерона, определяемая радиоиммунным методом, должна поддерживаться на уровне 30 нмоль/л (10 нг/мл) в первый день и между 55 и 75 нмоль/л (18–25 нг/мл) на второй день осеменения. Быстрый иммуноферментный метод (ELISA) определения также подходит для оценки качественного и количественного содержания прогестерона. У лисиц искусственное осеменение позволяет добиваться увеличения численности помета, и при правильном выборе даты оплодотворение наступает в результате одной процедуры.

Свежую сперму вводят во влагалище с помощью жесткого пластикового катетера, применяемого для осеменения коров, но укороченного до нужного размера. Катетер снабжен шприцем на 2–5 мл с резиновым поршнем (фиг. 9.6). Необходимо иметь в виду, что не всякий шприц можно использовать, поскольку некоторые типы резин оказывают токсическое воздействие на сперматозоиды.

Вводимый объем не должен превышать 3 мл для крупных пород и 2 мл для мелких, в противном случае сперма может вытекать из половых путей суки. Вульву приподнимают указательным пальцем и постепенно вводят во влагалище пластиковый катетер. После введения каудальный конец катетера приподнимают и ведут вдоль дорсальной стенки влагалища к своду влагалища для того, чтобы избежать попадания катетера в мочевой пузырь, поскольку отверстие уретры располагается на вентральной стенке влагалища. Второй рукой оператор пальпирует шейку матки через брюшную стенку, корректируя продвижение катетера. Сперму вводят медленно, после чего выдерживают самку в течение 10 минут в положении с приподнятым крупом. Поглаживание области вульвы вызывает сокращения матки, способствующие продвижению спермы.

Для осеменения свежей и замороженно-оттаяной спермой в лаборатории автора разработан специальный внутри маточный катетер (фиг. 9.6), состоящий из нейлоновой направляющей и металлического катетера с прикрепленным шприцем. Техника заключается во введении во влагалище направляющей трубки, с металлическим катетером внутри; после того, как трубка коснется свода влагалища, металлический катетер выдвигают вперед и вводят в шейку матки, придерживая ее большим и указательным пальцем через стенку брюшной полости (фиг. 9.7). Канал шейки прямой с незначительными складками и почти полностью раскрыт на стадии эструса, поэтому введение катетера обычнд не вызывает затруднений. Для выполнения процедуры животное поднимают на стол, седация обычно не требуется (фиг. 9.8). Выполнение манипуляции предполагает наличие определенных навыков, занимает у опытного оператора не более 1–2 минут и не причиняет животному дискомфорта. После выполнения внутриматочного осеменения приподнимать тазовую область суки необязательно.

Три различных вида катетеров с нейлоновой направляющей трубкой, используемых для трансцервикального внутриматочного искусственного осеменения собак. Внизу - обычный пластиковый катетер для коров, укороченный до необходимой длины для интравагинального осеменения у собак

Искусственное осеменение собаки с помощью внутриматочного катетера. Поверх катетера надета пластиковая трубка, предотвращающая контаминацию влагалищной микрофлорой или травму слизистой влагалища металлическим катетером

Трансцервикалъное искусственное осеменение. Животное находится на столе. Седация обычно не требуется, процедура занимает менее 5 мин.

Рекомендуемая доза при внутриматочном осеменении замороженно-оттаявшей спермой составляет 100 х 10 6 сперматозоидов на одно осеменение, однако оплодотворение обеспечивается и меньшим количеством сперматозоидов - 35–40 х 10 6 на одно осеменение при условии корректного выбора даты проведения процедуры и соблюдения технологии размораживания спермы. Доза 100 х 10 6 /мл основана на результатах экспериментов автора со спермой лисиц, в ходе которых важным параметром являлась численность помета. При осеменении в ходе лапаротомии можно ограничиться еще меньшим количеством спермы, однако, насколько известно автору, подобные эксперименты не проводились.

Несмотря на возможность интравагинального осеменения при использовании замороженно-оттаявшей спермы наилучшие результаты обеспечивает внутриматочное осеменение, позволяющее к тому же снизить дозу спермы.

Если катетеризация невозможна или оператор незнаком с техникой ее проведения, рекомендуется искусственное осеменение в ходе лапароскопии или с применением эндоскопа. В США и Канаде хирургические методы искусственного осеменения являются наиболее распространенными. Однако в большинстве европейских стран интравагинальное осеменение, а также техники с применением катетера и эндоскопа считают более этичными.

Andersen К. (1975) Insemination with frozen dog semen based on a new insemination technique. Zuchthygiene 10 , 1.

Evans H. E. and deLahunta A. (1971) Miller"s Guide to the Dissection of the Dog. Revised reprint. W. B. Saunders Company, Philadelphia.

Farstad W. (1984a) Bitch fertility after natural mating and after artificialinsemination with fresh or frozen semen. Journal of Small Animal Practice 25 , 561–565.

Farstad W. (1984b) The correlation between a cyclus coefficient basedon cytological indices in the vaginal smear and circulating progesterone in oestrous bitches. Zuchthygiene 19 , 211–217.

Farstad W. (1992) The optimum time for artificial insemination of blue fox vixens (Alopex lagopus) with frozenthawed semen from silver foxes (Vulpes vulpes). Theriogenology 38 , 853–865.

Farstad W. (1996) Semen cryopreservation in dogs and foxes. Proceedings, XIII International Congress on Animal Reproduction and Artificial Insemination, Sydney. Animal Reproductive Science 42 , 1–4, 251–260.

Farstad W. and Andersen Berg К. (1989) Factors influencing the success rate of artificial insemination in the dog. 39 , 289–292.

Hofrno P. O. (1988) Studies on Cr/opreservation of Fox Spermatozoa and Evaluation of the Fertilizing Capacity of Frozen-tha/ved Silver Fox Spermatozoa. PhD thesis, Norwegian College of Veterinary Medicine, Oslo.

Kieffer J. P. (1992) Accouplement dans Tespece canine (mating in thecanine species) In: Les Indispensables l"Animal de Compagnie. Reproduction, ed. С. Dumon and A. Fontbonne, pp. 67–73. P. M. C. A. C, Paris.

Kumi-Diaka J. and Badtram G. (1994) Effect of storage on sperm membrane integrity and other functional characteristics of canine spermatozoa: In vitro bioassay for canine semen. Theriogeno/ogv 366. 41 , 1355–1

Laing J. A., Brinley Morgan W. J. and Wagner W. C. (1988) Fertility and Infertility in Veterinary Practice, 4th edn, pp. 10–12. Balliere-Tindall, London.

Linde-Forsberg С. (1995) Artificial insemination with fresh, chilled extended and frozen-thawed semen in the dog. Seminars in Veterinary Medicine and Surgery (Small Animal) 1 , 48–58.

Nothling J. O. and Valkman D. H. (1993) Effect of addition of autologous prostatic fluid on the fertility of frozen-thawed dog semen after intravaginal insemination. Journal of Reproduction and Fertility 47, 325–327.

Oettle E. (1986) Using a new acrosome stain to evaluate sperm morphology. Veterinary Medicine 3 , 263–266.

Roberts S. J. (197 i)Veteri nary Obstetrics and Genital Diseases (Theriogenology), pp. 609, 620. Edwards Brothers Inc., Ann Arbor Michigan, and Ithaca, New York.

Rodriguez-Gil J. E., Montserrat A. and Rigau T. (1994) Effects of hypoosmotic incubation on acrosome and tail structure on caninespermatozoa. Theriogenology 42 , 815–829

Rota A., Strom В. and Linde-Forsberg С. (1995) Effects of seminal plasma and three extenders on canine semen stored at 4?C. Theriogenology 44 , 885–887.

Silva L. D. M., Onclin K., Snaps F. and Verstegen J. (1995) Laparoscopic intrauterine insemination in the bitch. Theriogenology 43 , 615–623.

Wilson M. (1993) Non-surgical artificial insemination in bitches using frozen semen. Journal of Reproduction and Fertility 47 , 307–311.

Для того, чтобы между врачами и заводчиками не происходило путаницы в терминологии, следует рассмотреть основные понятия, используемые в репродукции. Понятие “искусственное оплодотворение” подразумевает под собой широкий спектр технологий, способствующих успешному зачатию как в организме женщины/самки животного, так и вне его. Применительно к ветеринарной медицине, рассуждая о понятии “искусственное оплодотворение” и владельцы и врачи чаще всего имеют в виду “искусственное осеменение” или “инсеминацию”, то есть введение порции спермы во влагалище или матку самки при помощи катетера/эндоскопически/хирургически.

Экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО, “зачатие в пробирке”) у мелких домашних животных осуществляется в специализированных эмбриологических лабораториях для исследовательски-научных целей и пока недоступно для ветеринарных клиник.

Для чего же нужна процедура искусственного осеменения?

Проводят ее не только в случаях, когда требуется медицинская коррекция бесплодия. Например, часто при планировании клубной вязки оказывается, что подходящие друг другу кобель с сукой живут на большом расстоянии, возможно, даже в разных странах. В таком случае, чтобы не подвергать животных транспортному стрессу, возможна консервация (охлаждение, заморозка) спермы кобеля и доставка ее суке. Или владельцы высокопородистого кобеля могут быть обеспокоены потенциальной возможностью заражения заболеваниями, передающимися половым путем - в случае искусственного осеменения эти риски отсутствуют. Еще мы применяем искусственное осеменение в случаях “несовпадения по темпераменту” - агрессивная сука или кобель с проблемами либидо, в случаях различий животных по размеру, а также анатомо-физиологических особенностей, делающих нормальный коитус невозможным.

Искусственное осеменение в ветеринарных клиниках проводят в основном собакам, так как этот способ подразумевает работу со спермой, а получение спермы у кошачьих связано с определенными трудностями (невозможность получить эякулят методом мануальной стимуляции) и требует специализированного оборудования (электроэякулятор). У собак обычно получение спермы ручным методом не представляет трудностей и проводится в условиях ветеринарной клиники.

Врач-репродуктолог готовит течную суку к процедуре искусственного осеменения, определяя оптимальное время по уровню прогестерона в крови и отслеживая развитие фолликулов на УЗИ. Если предстоит осеменение свежей спермой, то непосредственно перед процедурой кобелю проводится спермограмма, если осеменяют охлажденной или замороженной спермой, уже проверенной ранее, то все равно проводится подготовка порции спермы с вторичным контролем качества.

Иванова Надежда Викторовна Ветеринарный врач. Специализация: терапия, репродукция

Если сука и кобель признаны пригодным к разведению, можно приступать к процедуре искусственного осеменения. Существует несколько способов. Самый простой метод - катетеризация, это умеют делать сами многие заводчики. При этом способе сперма вводится по катетеру во влагалище суки. Это достаточно несложно, но успешное осеменение возможно только при использовании свежей спермы, в крайнем случае, охлажденной. Для осеменения замороженной спермой этот способ не подходит, так как для оплодотворения сперма должна попадать непосредственно в полость матки. В условиях ветеринарной клиники осуществляют трансцервикальный способ осеменения (TCI) при помощи эндоскопа или интраоперационный (под наркозом через разрез на брюшной стенке наружу извлекается рог матки и, прокалывая его стенку, порцию спермы вводят непосредственно в полость матки).

Как это делается у нас?

В нашей клинике трансцервикальный метод осеменения проводится без наркоза. Эндоскопическая процедура безболезненна для животного. Отличная визуализация структур полового тракта суки (мы используем эндоскоп KARL STORZ) позволяет врачу-репродуктологу быстро и аккуратно проходить через шейку матки и быть уверенным, что вся порция спермы попадает в полость матки. Вместе с осеменением врач, осматривая камерой эндоскопа состояние стенок влагалища и структур матки, еще раз удостоверяется, что половые пути самки пригодны для протекания беременности и родов (отсутствие воспалительных процессов, анатомических деформаций и пр.)

М. Г. Миролюбов

Всё о собаках –

Миролюбов М.Г. Иванов В.В. Равилов Р.Х.

Искусственное осеменение собак

КАЗАНСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ им. Н.Э. БАУМАНА

Кафедра патологии мелких животных и оперативной хирургии

ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ СОБАК

Казань - 2003

Миролюбов М.Г. - профессор кафедры акушерства и гинекологии КГАВМ, доктор ветеринарных наук;

Иванов В.В. - кандидат ветеринарных наук, ст.преподаватель каф. патологии мелких животных и оперативной хирургии КГАВМ

Равилов Р.Х. - профессор, доктор ветеринарных наук, зав. кафедрой патологии мелких животных и оперативной хирургии КГАВМ;

Рецензенты:

Зухрабов М.Г. - профессор, доктор ветеринарных наук, зав кафедрой акушерства и гинекологии КГАВМ.

Шакуров Ф.Ш. - профессор, доктор ветеринарных наук, зав кафедрой общей и частной хирургии КГАВМ.

ВВЕДЕНИЕ

Собаководство давно известно в мире. В России оно начало развиваться в начале 20 века в основном в районах Севера, где разводили упряжных собак и охотничьих В 1925 году состоялся первый съезд кинологов, утвердивший стандарты основных пород и принявший «Положение о племенном разведении собак». Сегодня в каждом регионе страны имеются многочисленные клубы, федерации кинологов, питомники, заводчики, занимающиеся разведением различных пород собак. В арсенале кинологов-селекционеров метод искусственного осеменения пока применяется на стадии «проб и ошибок», так как нет учебников и учебных пособий по данной проблеме. Правильному решению вопросов организации искусственного осеменения собак могут способствовать настоящие рекомендации, составленные на основе достижений передовой науки, собственного опыта.

КРАТКИЙ ИСТОРИЧЕСКИЙ ЭКСКУРС

Первый опыт по искусственному осеменению собак был проведен в Италии в 1780 году. Аббат Спалланцани ввёл несколько капель спермы кобеля в половые пути суки, которая успешно забеременела и, через два месяца родила тесть щенков. В то время считалось, что спермии и есть те микроскопические существа, которые развиваются в организме матери. В середине двадцатого столетия американский ученый Фут провел многочисленные опыты на собаках. Он же разработал рецептуру растворов, предназначенных для консервирования спермы.

Искусственное осеменение собак уже применяется во многих странах мира: Америке, Канаде, Англии, Австралии, Дании, Швеции, Финляндии и т. д. Для осемене н ия используют свежеполученную, охлаждённую или замороженную сперму.

Методы получения спермы от кобеля - получение на искусственную вагину. Впервые искусственную вагину предложил в 1913 г. итальянский физиолог Джузеппе Амантеа. Это искусственное влагалище состояло изрезиновой груши, внутрь которой наливали теплую воду, азатем вставляли в него резиновый мешочек и закрепляли при помощи кольца; второй мешочек из более тонкой резины вводили внутрь первого, он служил спермоприемником. На кафедре акушерства КГАВМ профессором Миролюбивом М.Г. также разработана искусственная вагина для собак.

В 1973 году в Техасе группа ветеринаров под руководством доктора Зигера (Seager S.W.) получила первый помет от суки, которая была искусственно осеменена замороженной спермой.

В Европе первый исследовательский центр искусственного осеменения собак был создан в Ветеринарном институте г. Осло (Норвегия) на базе лаборатории профессора Андерсена. Скандинавские заводчики не могли вязать своих сук с кобелями, проживавшими за границей из-за строгих карантинных барьеров. Кроме того, в Скандинавии имелись наработки по искусственному осеменению клеточных лисиц, что позволило совершенствовать эти методы для собак.

В 1981 году во Франции, в г. Мезон-Альфорс профессор Ветеринарной школы доктор Тере получил задание Центрального Кинологического общества и Министерства сельского хозяйства начать исследования по замораживанию спермы кобеля и совершенствованию методик искусственного осеменения. В апреле 1982 впервые была получены щенки в результате искусственного оплодотворения сук замороженной спермой.

Только в 1985 году там же была создана реальная коммерческая структура (центр исследований проблем репродукции собак) для координации исследований и сбора информации в области искусственного осеменения собак, управления банком консервированной спермы и обучения ветеринаров-спеацалистов в этой области. К 1988 году были детально изучены все аспекты искусственного осеменения собак, разработаны методики и конкретные рекомендации заводчикам.

Работы вданном направлении намечены и в нашей стране. В 1996 г. состоялось совещание научной комиссии Российской Кинологической Федерация, где был рассмотрен вопрос об использовании метода искусственного осемене ни я собак в кинологических организациях РКФ. Было принято решение о разработке «Инструкции по регистрации потомства, полученного от искусственного осеменения собак», которая утверждена 3 февраля 1997 г. племенной комиссией Президиума РКФ (см. «Вестник РКФ», 1997, № 2, С. 10).

НЕКОТОРЫЕ МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ПОЛОВОЙ СИСТЕМЫ СОБАК

Размеры половых органов собак сильно варьируют в зависимости от породы и стадии полового цикла.

Самка (сука)

Вульва (петля) расположена вентрально по отношению ко дну таза. Просвет преддверия влагалища очень узок, вначале направлен вверх почти вертикально, на нижней стенке преддверия имеется большая ямка клитора. Поэтому для исследования используют специальные (узкие) инструменты, которые вводят под углом 60° по верхнему своду преддверия. У некоторых сук за отверстием мочеиспускательного канала имеется рудимент девственной плевы, мешающий случке или искусственному осеменению. Преддверие влагалища имеет хорошо развитую циркулярную мышцу для удерживания полового члена во время полового акта (замок).

Краниальная часть влагалища сужается благодаря дорсально-срединной складке слизистой оболочки; каудальный конец этой складки часто ошибочно принимают за шейку матки. Во влагалище имеются многочисленные продольные складки. Для определения даты искусственного осеменения может быть полезна оценка степени утолщения влагалищной стенки (определяется по количеству первичных и вторичных продольных складок) и пролиферации эпителия.

Шейка матки имеет влагалищную часть, которая выпячивается во влагалище. Между влагалищной частью шейки матки и стенкой влагалища образуется «слепой» мешок. Поэтому обычным катетером попасть точно в отверстие шейки матки невозможно, так как он будет упираться в «слепой» мешок. Канал шейки матки приоткрыт во время течки и охоты, родов и в послеродовой период, в другие физиологические фазы он закрыт.

Матка Y-образная, состоит из короткого тела и двух длинных рогов. Во время течки рога матки удлиняются, образуя складки. В просвете матки происходит экстравазация эритроцитов, наблюдаются серозно-кровянистые выделения, что может служить признаком для определения приблизительной даты искусственного осеменения.

Яйцепроводы имеют широкую ампулу, где происходит оплодотворение. Воронка яйцепровода одним концом прикреплена к яичнику.

Яичник имеет овальную форму, во время течки имеет бугристую поверхность (из-за многочисленных растущих фолликулов). Снаружи яичник покрыт фиброзной сумкой (бурзой) и обильными жировыми отложениями.

Самец (кобель)

Препуциальный мешок длинный. Половой член имеет в толще кость длиной до 10 см, а у основания парные пещеристые тела. Кость необходима длявведения полового члена во влагалище суки в неэректильном состоянии, после нескольких фрикций половой член сильно увеличивается в объеме, заполняя всю полость влагалища, а пещеристые тела у основания члена приобретают сферическую форму и фиксируются во влагалище, участвуя в механизме склещивавния (замок). Это необходимо учитывать при получении спермы путем мастурбации или с применением искусственной вагины.

Из придаточных половых желез у кобелей имеется только простата, пузырьковидные и луковичные железы отсутствуют. Секрет простаты при эякуляции образует самую объёмную фракцию эякулята.

ПОЛОВОЙ ЦИКЛ СОБАК

Половая зрелость у собак наступает в 6-10 мес., физиологическая в 1,5-2 года.

Продолжительность полового цикла - 5-8 мес, (колебания 3-13 мес.). Таким образом, в течение года у крупных пород может наблюдаться один-два, а у мелких пород собак - два- три половых цикла. Течка и охота могут наступать в любое время года, но чаще в феврале-марте.

I. СТАДИЯ ВОЗБУЖДЕНИЯ в среднем 12 (9-25 дней). С приближением периода течки, примерно за месяц до неё появляются характерные поведенческие черты. Сука часто и понемногу мочится в разных местах, всё тщательнее выбирая место для мочеиспускания. Некоторые собаки переходят на вполне определённое обозначение занятого участка или маршрутов движения. Некоторые суки по мере приближения течки становятся беспокойными и всё чаще просятся на улицу.

Течка - характеризуется отёчностью, увеличением половой петли, кровянистыми выделениями из неё (повышенная проницаемость сосудов, выход эритроцитов). Слизистая влагалища розовая, слегка отёкшая, с продольными и поперечными складками. Первые 2-3 дня выделения прозрачно-слизистые, иногда не заметные, затем обильные, слизисто-кровянистые, после овуляции снова просветляются.

В моче и выделениях из вульвы собак содержатся феромоны, запах которых привлекает кобелей и улавливается ими на значительном расстоянии.

Половое возбуждение - проявляется беспокойством, частым мочеиспусканием, облизыванием вульвы, ослаблением или извращением чутья у розыскных собак. Самка становится непослушной, заигрывает с кобелями, вскакивает на других собак, допускает вспрыгивание на себя, но коитуса не допускает. При вагиноскопии слизистая влагалища бледно-розовая, отёчная, со вторичными складками. Секрет умеренный, похож на мясной сок.

Охота - влечение самки к самцу. Самка становится в позу для полового акта, отводит хвост в сторону. Также отмечается некоторое уменьшение отёчности половой петли, более светлые или бесцветные выделения из неё. При дотрагивании до промежности и половой петли самка реагирует подтягиванием вульвы и отведением хвоста в сторону.

Овуляция происходит, как правило, на 1-3-й день от начала охоты или задерживается до 5-7 дня охоты.

Слизистая влагалища бледная, гиперпластичная; сухая, количество складок максимальное, выделения малого количества, похожи на мясной сок.

Все созревшие фолликулы (их число от 3 до 15) овулируют в течение 12-24 часов.

У собак, в отличие от других животных, яйцеклетки после выхода из яичника являются незрелыми и становятся годными к оплодотворению только после 2-Зх дневного пребывания в яйцепроводе, а спермии кобеля, поступая в половые пути самки при спаривании, могут сохранять оплодотворяющую способность до 7 суток.

Этими особенностями можно объяснить частые явления суперфекундации (множественное оплодотворение спермой разных самцов).

II. СТАДИЯ ТОРМОЖЕНИЯ - 60-90 дней. После овуляции на месте лопнувших фолликулов образуются жёлтые тела, продуцирующие гормон прогестерон, который стимулирует эндометрий для создания благоприятных условий для имплантации оплодотворенных яйцеклеток и развития беременности Слизистая влагалища бледно-розовая, поверхность плоская, небольшие продольные складки, выделения желтоватые, липкие.

Самки перестают допускать кобелей для коитуса (отбой), исчезает отёчность вульвы, прекращаются выделения.

Секреция прогестерона (независимо от того беременна самка или нет) достигает максимального уровня в крови (3-40 нг/мл плазмы) к 20-35 дню метэструса, а затем начинает медленно снижаться (достигая 1 нг/мл) к дате начала родов (60-70 дню). Поэтому по уровню прогестерона у собак невозможно дифференцировать щенное состояние от нещенного или от ложной щенности. В этой стадии цикла у старых собак часто возникают заболевания матки, в частности пиометра, чему способствуют продолжительное воздействие прогестерона на матку, предрасполагающие к развитию кистозных изменений в эндометрии и снижающие его резистентность к инфекции.

III. СТАДИЯ УРАВНОВЕШИВАНИЯ составляет в среднем 125 дней (15-265 дней). После рассасывания жёлтых тел, в яичниках длительное время никаких изменений не происходит. Каких либо характерных изменений со стороны наружных половых органов и поведения самки не отмечается. Слизистая влагалища розовая, поверхность плоская, покрыта небольшими продольными складками, выделений почти нет.

В течение 5-7 летнего возраста интервалы полового цикла остаются стабильными. С возрастом течка наступает 1 раз в год.

ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ СОБАК

Искусственное осеменение - гинекологическая операция, заключающаяся в получении спермы от самца, её оценке, разбавлении и введении в половые органы самки с помощью специальных инструментов.

Преимущества искусственного осеменения:

С помощью метода искусственного осеменения можно решить ряд проблем в собаководстве.

При использовании замороженной спермы, возможно её накопление от выдающихся производителей и хранение в криобанке в течение многих лет, для использования в будущем;

Использование криоконсервированной спермы позволяет производить её международный обмен без необходимости перевозки самих собак. При этом появляется возможность заказного осеменения сук спермой любого производителя;

Проще выполнять карантинные ограничения, которые препятствуют перемещению животных из одной страны в другую;

Искусственное осеменение позволяет предотвращать возникновение многих заболеваний, передающихся половым путём, так как в состав синтетических разбавителей спермы обязательно вводятся антибиотики, а также исключается половой контакт животных, большинство микробов и вирусов не передается при искусственном осеменении.

Помимо этого, искусственное осеменение может также рекомендоваться в ряде случаев:

Невозможность естественной случки вследствие узкого и короткого влагалища у сук;

Чрезмерно агрессивное поведение животных во время случки;

Низкая эффективность естественного спаривания вследствие определенных породных особенностей собак (очень крупные и тяжёлые породы и т. д.);

Наличие определённых заболеваний у кобеля или суки, не позволяющих производить полноценную случку (заболевание конечностей, бедра, спины и т. д.).

МЕТОДЫ ПОЛУЧЕНИЯ СПЕРМЫ

У кобелей сперму получают способом мастурбации, на искусственную вагину и с помощью электроэякуляции.